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笃玛 EDTA抗凝兔血 价格

  • 这真不是您需要的产品?
  • 品  牌:
  • DM
  • 主要规格:
  • 100ml/500ml
  • 用  途:
  • 科研
    • EDTA抗凝兔血 试剂及配制 1、缓冲生理盐水: ( 1) 贮存液: Na2HPO4.12H2O 2.85g KH2PO4 0.27g NaCl 17.00g 蒸馏水定容至 100ml 4℃保存备用 ( 2)应用液: 5ml 贮存液加 95ml 蒸馏水,再加 10%硫酸镁 0.1ml, 当日配制, 12 小时内使用。 2、2%绵羊红细胞:无菌采取绵羊血液,于等量 Alsever 液中可保存 3 周。用前以缓冲液洗 3次,并配成 2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。 3、溶血素:将绵羊红细胞溶血素(效价 1:4000),用应用液做 1:2000 倍稀释(即 1ml 溶血素加 1999ml 应用液)。 4、待测血清:新鲜血液室温放置 30min,再 4℃放置 60min,使血块收缩, 4℃离心( 3000r/min)10min,取上清, -20℃保存。 EDTA抗凝兔血 标本要求 1. 血清: 室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保 存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 2. 血浆: 应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。 3.尿液: 用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀 形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。 4.细胞培养上清: 检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。 5.培养细胞: 检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。 通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左 右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 6.组织标本: 切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化 后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀 浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检 测,其余冷冻备用。 7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进 行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 8.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 EDTA抗凝兔血 常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。 Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。 His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和纯化,是目前使用最广泛的一种。 GST标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。 GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。 Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。 HA标签系统利用一个HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛运用。 MBP标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端??捎肕BP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。 其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等,但应用相对较少。
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